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Hidroarsenicismo Crónico Regional Endémico (H.A.C.R.E.) y patologías gingivoperiodontales en pobladores del Chaco (Argentina).

Medina, Myriam L.; Merino, Luis A.; Miranda, Olga; Gorodner, Jorge O. Instituto de Medicina Regional / Universidad Nacional del Nordeste

 
Antecedentes

Las enfermedades endémicas relacionadas al medio físico (geoambiente) son en la actualidad estudiadas por una rama de la ciencia llamada geomedicina. Esta fue definida por Läg en 1990 como “la ciencia que trata la influencia de los factores ambientales sobre la distribución geográfica de los problemas de salud en hombres y animales”.

El agua subterránea es la principal fuente de suministro para consumo humano y para las prácticas agropecuarias en gran parte del mundo, debido a ello, se consideran de fundamental relevancia dos geoindicadores, esto es, calidad y niveles de agua subterránea. Un ejemplo de falta de calidad de agua subterránea lo constituye la presencia de arsénico en el mismo, donde superado el umbral establecido según estándares nacionales e internacionales, se convierte en inapropiado para el consumo humano y para el funcionamiento de los ecosistemas.

El Arsénico (As) es un metaloide naturalmente presente en el aire, el suelo y el agua. En todos ellos su concentración puede incrementarse por polución industrial o debido al uso de agroquímicos. Es un compuesto semimetálico de importancia toxicológica debido a su gran impacto ambiental, incluso en bajas concentraciones. Su presencia en el agua y en los alimentos para consumo humano, aún en pequeñas cantidades y a través de los años, debido a su poder acumulativo, es capaz de producir, en el hombre predispuesto, serias lesiones en diversos órganos, entre ellos, la piel.

El Hidroarsenicismo Crónico Regional Endémico (H.A.C.R.E.); es considerado un síndrome toxidérmico adquirido causado por la ingestión prolongada de aguas con alto contenido de arsénico en personas susceptibles. Esta patología regional genera un problema sanitario particularmente grave en lugares donde el abastecimiento de agua depende mayoritariamente de pozos, cuyo análisis sistemático muchas veces queda fuera del alcance de los Organismos controladores.

En diversas zonas de nuestro país existen suelos con alto contenido de arsénico. Las zonas del país con valores de arsénico en el agua mayores que las establecidas como límites de riesgo para el hombre, abarcan una gran parte del territorio nacional. Ellas incluyen zonas determinadas de las provincias de Chaco, Córdoba, Formosa, La Pampa, Buenos Aires, Salta, San Luis, Santa Cruz, Santa Fe, Santiago del Estero y Tucumán.

Los objetivos de este trabajo fueron valorar la utilidad diagnóstica de la determinación de arsénico en saliva, determinar si existe relación entre los niveles de arsénico en saliva y pelo de los individuos afectados y reconocer cambios producidos por la acción del arsénico en los tejidos gingivoperiodontales y en los marcadores de riesgo de enfermedad periodontal.

Materiales y métodos

En primer lugar, se elaboró una historia clínica completa de cada paciente, previo consentimiento escrito de los mismos.
Luego de un minucioso examen de la cavidad oral, se confeccionó el odontograma correspondiente. Posteriormente a partir del examen de los tejidos periodontales, se evaluó el riesgo y/o actividad de enfermedad periodontal analizando los siguientes parámetros: Índice de O´Léary, Índice de Löe y Silness, medición de bolsas periodontales, presencia de hemorragia al sondaje, grado de movilidad dentaria, presencia de cemento expuesto, presencia de tártaro, bruxismo y otros hábitos, obturaciones desbordantes y otros factores que retengan placa, según consta en la bibliografía consultada.

Completada la ficha individual correspondiente se procedía a tomar las muestras utilizadas para determinar el nivel de arsénico en cada uno de los pacientes. Se procedió de la siguiente manera:


a) Muestra de placa subgingival: se solicitó a los pacientes que no fumaran, comieran, bebieran ni se cepillaran durante dos horas previas a la recolección de la muestra. Se aislaron con rollos de algodón los cuadrantes y se secó la zona de recolección de muestras Se observaron las regiones que presentaban bolsas profundas y signos activos de enfermedad periodontal. Se eliminó la placa supragingival con cureta periodontal esterilizada actuando en sentido coronal. Se introdujo una sonda periodontal estéril en la profundidad de la bolsa, desde allí se la desplazó en sentido coronal con una firme presión lateral hacia las paredes radiculares. Luego se retiró la cureta y se la sumergió en un medio de transporte anaeróbico (1 ml de caldo de tioglicolato) para luego llevar a cabo el cultivo. En los casos que se encontró cantidades reducidas de placa subgingival se empleó tres puntas de papel absorbente, c/u de ellas durante 10 segundos. Después de haber colocado la última se procedió a retirar todas juntas. A continuación se procedió a retirar placa subgingival del fondo de la bolsa periodontal mediante cureta periodontal o punta morse estéril y la muestra se suspendió en un vial conteniendo 0,3 ml de solución fisiológica y gelatina al 1%. Finalmente, las muestras fueron congeladas a -20ºC, hasta su posterior observación por medio de microscopía de campo oscuro.

b) Muestras de saliva: se solicitó a los pacientes que salivaran durante cinco minutos en recipientes estériles de plástico (salivación espontánea). Luego, se les pidió que masticaran una goma de base inerte (lámina de parafina = 1g) y salivaran en recipientes estériles de plástico (salivación estimulada). Las muestras se congelaron a -20ºC hasta el momento de su análisis cualitativo.

c) Muestras de pelo: Se procedió al corte de cabello de la porción occipital (entre cinco y siete puntos distintos de la nuca), de la zona más cercana al cuero cabelludo en cantidades no menores a 0,5 gr. En los casos de cabellos largos se sostuvo el cabello con un clip, se separó en secciones y se cortó la porción cercana al cuero cabelludo, descartándose el resto. Dichos mechones tuvieron un largo de entre 25 y 40 mm. Las muestras fueron recolectadas en recipientes estériles de plástico correctamente identificados para su posterior análisis toxicológico.
d) Estudios bacteriológicos de muestras de placa subgingival: Las muestras contenidas en caldo tioglicolato fueron procesadas dentro de las 12 horas postextracción. Con un ansa calibrada de 5 ml se sembraron la muestras en dos placas de agar base Columbia con 5% de sangre de carnero incubándose una en atmósfera de CO2 al 5% y la otra en anaerobiosis. Luego de incubar 72 horas a 35ºC se procedió a efectuar las identificaciones correspondientes teniendo en cuenta la morfología y el pigmento de cada colonia. Por último, se efectuó la observación microscópica de las características morfológicas, tintoriales y se realizaron pruebas bioquímicas. Las muestras de placa subgingival contenidas en solución fisiológica se destinaron a la observación microscópica con condensador de campo oscuro para observar espiroquetas, para lo cual se homogeneizaron previamente con jeringa de tuberculina.

e) Análisis de la bioquímica salival: En las muestras de saliva obtenidas por salivación espontánea se determinó el volumen de flujo salival mediante una pipeta graduada. Se determinó la presencia de IgA secretora por inmunodifusión radial, de acuerdo a las especificaciones del fabricante (Diffu-Plate® Biocientífica S.A.). Las concentraciones de sodio (Na+) y potasio (K+) se determinaron mediante fotometría de llama y los niveles de cloruros (Cl-), fosfatos (P) y proteínas totales, a través de espectrofotometría. Por otro lado se estudió el pH de las muestras mediante tiras reactivas.

f) Análisis toxicológico: Las muestras de saliva obtenidas por salivación estimulada y las muestras de pelo fueron enviadas a un laboratorio en la ciudad Buenos Aires (Anedra S.A.), donde se determinó la presencia de arsénico mediante la técnica de Absorción Atómica de llama (AAHVG Llama) por método EPA 206.3-1997 para saliva y EPA SW 7061ª-1997 para pelo.

g) Análisis estadístico: Para comparar la relación entre variables cualitativas se aplicó la prueba de ji cuadrado mientras que para comparar las medias aritméticas de valores cuantitativos se empleó la prueba de t de Student. Se consideró valor significativo para p <0,05. Para ello se utilizó el programa EPI Info 6.0.

Discusión de resultados

En el período noviembre 2001 a noviembre 2002 se diagnosticaron en el Servicio de Dermatología del Hospital 4 de Junio de Pcia. Roque Sáenz Peña, en el Consultorio de Dermatopatología del Instituto de Medicina Regional y en el Centro Dermatológico de la ciudad de Resistencia 24 pacientes con H.A.C.R.E.. Quedaron excluidos del trabajo dos pacientes que se negaron a participar y dos que no pudieron localizarse, totalizando 20 casos, todos residentes en el área de estudio, con lesiones específicas de H.A.C.R.E. y niveles de arsénico en pelo mayores a 1 mg por gramo de muestra enviada. Se tomaron como controles los primeros 20 pacientes que residían fuera del área endémica, de los 36 seleccionados.

El rango etario de los casos fue de 15 a 68 años y de 19 a 67 años para los controles. El promedio de edad de los casos fue de 47,2 años y de 40,6 años para los controles (p>0,05). La distribución por sexo en los controles fue de 14 hombres y 6 mujeres y entre los casos se incluyeron 12 hombres y 8 mujeres. La distribución según lugar de residencia habitual de casos fue: Pcia. Roque S. Peña (5 pacientes), Santa Sylvina (6), Charata (2), Chorotis (1), Villa Berthet (5), Gancedo (1), y la residencia de los controles fue: Resistencia (18), Tirol (2). Con respecto a los hallazgos clínicos en los pacientes con H.A.C.R.E. 15 presentaban prurito y 9 calambres. Los signos hallados más frecuentes fueron las estrías ungüeales en 9 casos y los eritemas en 5. Tanto los síntomas como los signos se hallaron asociados en diversos pacientes. En cuanto al uso de fármacos predisponentes de enfermedad periodontal, 2 de los 20 casos los consumían mientras que solamente 1 de los controles lo hacía. Con relación a los hábitos tóxicos se halló que el hábito de fumar era más frecuente en los controles (45%) que en los casos (25%), registrándose en los últimos 1 paciente etilista crónico.

En lo referente a enfermedades sistémicas en los casos se observó hipertensión arterial en dos pacientes y diabetes en igual número. Tanto en casos como en controles se halló un individuo con asma. Los tipos de lesiones por H.A.C.R.E. se presentan en la Tabla 1, siendo la predominante la queratodermia. Los hallazgos clínicos gingivoperiodontales, que incluyen los criterios para determinar actividad y/o riesgo de enfermedad periodontal (Tabla 2) no arrojaron diferencias significativas con respecto al grupo control. En cuanto a los distintos cuadros gingivoperiodontales hallados, puede afirmarse que no hubo diferencias significativas respecto del grupo control (p=0,13). Los resultados de la bioquímica salival obtenidos (Tabla 3) tampoco mostraron diferencias significativas entre los grupos estudiados. De los cultivos de placa subgingival se aislaron con mayor frecuencia Streptococcus viridans, Fusobacterium spp y Prevotella spp en ambos grupos, no hallándose diferencias estadísticamente significativas. En todos los casos se encontraron niveles de arsénico en pelo superiores a los valores de referencia, mientras que en saliva no ocurrió lo mismo (Tabla 4 y Gráfico 1).

En el H.A.C.R.E., considerado una enfermedad medioambiental, las manifestaciones clínicas dependen de un factor individual y del tiempo de exposición al tóxico. Las polimorfas manifestaciones de la intoxicación arsenical crónica se producen en una gran extensión de la Argentina. Involucran a la Provincia del Chaco con una endemia hidroarsenical pese a carecer de explotaciones mineras o fundiciones. El número de casos aumenta a medida que se avanza hacia la zona oeste de la provincia, que limita con Santiago del Estero y Salta; corresponde a la región semiárida y árida del Chaco, carente de ríos. Respeta las cuencas de los ríos (Bermejo, Paraguay, Paraná y ríos interiores). Existen varias fuentes de exposición al arsénico.

En el presente trabajo nos referimos a la hídrica por ser la de mayor importancia para la región en estudio. En nuestra región (llanura chaqueña), el arsénico del suelo es de origen volcánico, pero también puede proceder de la actividad agrícola. Diversos insecticidas a base de arsénico se utilizaron ampliamente para el control de la oruga del algodón hasta 1960, según lo confirman Barral y Zago. Si bien fueron desplazados por compuestos orgánicos, su uso en la provincia se prolongó hasta su prohibición total en 1990. La presencia de arsénico en aguas y suelo torna posible la contaminación de los alimentos de origen vegetal y animal producidos en el área, pudiendo afectar entonces a pobladores de zonas no endémicas. Los distintos relevamientos de niveles de contaminación con arsénico en aguas subterráneas de la provincia del Chaco evidencian una notable variación en la concentración según la zona de muestreo. Confirman, además, el riesgo al que se exponen las distintas poblaciones. La población expuesta habita amplias regiones que se encuentran en condiciones de subdesarrollo económico y social. Se trata de zonas áridas, carentes de ríos.

La provisión de agua para consumo se realiza por medio de pozos artesianos. Así se adquiere la intoxicación, tras el uso crónico de aguas arsenicales proveniente de tales fuentes. No obstante, se detecta una baja incidencia de lesiones por H.A.C.R.E. en la provincia, tal vez debido a que la mayoría de la población afectada con manifestaciones clínicas menores y benignas no consultan al respecto. Los pozos de la región no tienen la misma profundidad y por ende la misma cantidad de arsénico. La profundidad de los pozos se encuentra en relación con el volumen de precipitación pluvial de la zona. A menor volumen mayor profundidad. Todos los casos del estudio consumían agua de pozo. Esto concuerda con otros reportes que encuentran una correlación directa entre el consumo de agua de pozos artesianos y la sintomatología clínica típica. En el grupo de pacientes estudiados se encontró que a medida que se acrecienta la edad aumentan las probabilidades de padecer H.A.C.R.E (p<0,01), coincidiendo la edad promedio de los casos con aquella informada por otros autores.

De la misma manera que otros investigadores, se ha observado que no todos los miembros de una familia o habitantes de una misma casa adquieren la enfermedad por lo que se infiere debe existir una determinada disposición especial. No se encontraron diferencias significativas en las manifestaciones clínicas gingivoperiodontales ni en los hallazgos que determinan riesgo y/o actividad periodontal de los pacientes con H.A.C.R.E. versus controles. Tampoco se halló, en la revisión bibliográfica realizada, estudios que se refieran al respecto. Autores que estudiaron la intoxicación con plomo encontraron frecuentemente gingivitis y periodontitis. Aquellos que han estudiado la acción del mercurio a nivel oral encontraron estomatitis, gingivitis y movilidad dentaria producto de una periodontitis avanzada. Se observó un mayor aislamiento de bacterias anaerobias en los sitios activos en los que predominó la flora anaerobia facultativa.

Los microorganismos anaerobios y anaerobios facultativos considerados patógenos potenciales de enfermedad periodontal (P. intermedia, Fusobacterium, Peptoestreptococcus spp y Actinomycetemcommitans) fueron aislados exclusivamente de los sitios activos. P. intermedia y Peptoestreptococcus spp. se aislaron con mayor frecuencia de sitios con 5 a 6 mm de Profundidad de Sondaje (PS). En cuanto a estas especies se observó una mayor prevalencia en los sitios con PS. entre 5-6 mm, observándose una tendencia a la disminución en bolsas más profundas, con lo cual cabría la posibilidad de que éstos microorganismos pudieran estar asociados con periodontitis moderada y que podría existir una asociación entre ambos. Al respecto, nuestros hallazgos coinciden con los encontrados por otros autores. Socransky y col. han observado en sitios con periodontitis una asociación positiva entre especies de Peptoestreptococcus (específicamente Peptoestreptococcus micros) y P. intermedia. Tanner y col. También han encontrado una asociación significativa entre P. micros y enfermedad activa. Los resultados de este estudio coinciden con otros en los que P. intermedia y Peptoestretococcus spp están asociados con periodontitis del adulto.

La sialoquímica juega hoy un papel importante en la detección de contaminantes, fármacos, drogas y enfermedades locales y sistémicas. Su utilización se basa en la estrecha asociación que existe con los niveles plasmáticos, especialmente los de saliva de parótida, aunque el flujo salival y su composición varían de sujeto a sujeto y aún en un mismo individuo. Determinado nivel de distintos químicos y contaminantes ambientales se transportan hacia el interior de las glándulas salivales. Pero, exceptuando al mercurio y el cadmio, existe poca información sobre la detección de contaminantes por medio de saliva. Sin embargo, actualmente se le ha da gran importancia a la relación entre salud dental y contaminantes presentes en el ambiente.

Todo lo anterior nos motivó a evaluar el valor diagnóstico de la intoxicación por arsénico mediante el uso de saliva y su repercusión a nivel gingivoperiodontal. Justificado su empleo ya que se trata de una técnica sencilla y no invasiva para la recolección de muestras, que además permite detectar diferentes tóxicos y sustancias comúnmente presentes en el organismo. Nuestros resultados indicarían que la concentración de arsénico en saliva no se correlaciona directamente con la concentración en pelo. Solo en caso de exposición reciente se justificaría su empleo en la detección. Diversos investigadores estudiaron el papel de la saliva como indicador biológico de la exposición ocupacional al cadmio mediante espectofotometría de absorción atómica encontrando que refleja adecuadamente el grado de exposición reciente a dicho metal.

Nuestros hallazgos a nivel de pelo coinciden con los de otros autores. Revelan que su análisis resulta de utilidad como índice de exposición al arsénico, recalcando que en los exámenes de sospecha en sujetos expuestos, las valoraciones de mayor importancia corresponden a cabellos y orina. No encontramos en los pacientes con H.A.C.R.E. hallazgos que se describen para otros tóxicos, como la presencia de una línea verde azulada a nivel de la encía y/o tinción del esmalte dental (exposición al cobre); ulceraciones bucales en paladar y amígdalas, de fondo amarillento y difícil cicatrización típicas de la intoxicación por cromo. No evidenciamos la presencia de pigmentaciones a nivel de la mucosa oral que puedan atribuirse a metales como plata, cadmio, mercurio, cobre y plomo. Por otra parte, nuestros hallazgos coinciden en parte con los de la intoxicación por mercurio o por plomo, en las que se describen gingivitis y periodontitis. Por lo antedicho sería necesario ampliar el número de casos a fin de despejar variables tales como higiene del paciente, hábitos tóxicos, enfermedades sistémicas, etc.

Conclusiones

Puede concluirse que la determinación del nivel de arsénico en saliva no tendría valor diagnóstico para los casos de intoxicación crónica, sin embrago, podría tenerlo en intoxicaciones agudas. El pelo constituye una herramienta diagnóstica de gran valor en los casos de exposición crónica al tóxico pero no existe una relación entre los niveles de arsénico en pelo y en saliva en los pacientes con H.A.C.R.E.. Los parámetros de sialoquímica no tendrían valor para el diagnóstico del H.A.C.R.E. No existirían diferencias significativas entre los marcadores de riesgo de la enfermedad periodontal de los pacientes con H.A.C.R.E. y los controles, ni cambios evidentes en el tejido gingivoperiodontal indicativos de intoxicación crónica con arsénico.









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Medina, Myriam L.; Merino, Luis A.; Miranda, Olga; Gorodner, Jorge O. Instituto de Medicina Regional / Universidad Nacional del Nordeste
Av. Las Heras 727 / 3500 Resistencia, Argentina.
Tel/Fax: 03722 422793 / E-mail: lmerino@arnet.com.ar
Nota de enero de 2004


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